出版日期:2020年
发表刊物:《Food & Fermentation Industries》
论文作者:赵克芳,肖阳,邢东旭,黎尔纳,杨琼,邹宇晓,庞道睿,廖森泰
高尿酸血症由嘌呤代谢紊乱引发,常规降尿酸药物存在潜在副作用,寻找安全有效的天然降尿酸资源意义重大。桑黄作为传统药用真菌,虽已有研究表明其有降尿酸活性,但不同来源桑黄活性及物质基础差异的研究较少。研究旨在比较不同来源桑黄游离酚提取物的降尿酸活性并探究其物质基础,为桑黄降尿酸产品开发提供理论依据。
实验材料与方法
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材料与试剂
选用野生瓦宁木层孔菌、栽培粗毛纤孔菌、栽培瓦宁木层孔菌和野生粗毛纤孔菌4个桑黄样品,购置多种生化试剂及细胞培养相关材料。
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仪器设备
采用酶标仪、旋转蒸发仪、超高效液相色谱 - 串联质谱仪等多种仪器进行实验分析。
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实验方法
通过溶剂提取法制备桑黄游离酚提取物,利用福林酚法和亚硝酸钠 - 硝酸铝法分别测定游离酚和游离黄酮含量。采用比色法测定黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制率,建立人肾小管上皮细胞(HK - 2)高尿酸细胞模型,研究桑黄游离酚提取物对其尿酸含量影响,并运用超高效液相色谱 - 串联质谱(UPLC - MS/MS)分析活性较强提取物的成分。
实验结果
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酚类物质含量比较
不同来源桑黄游离酚提取物中多酚及黄酮含量差异显著。栽培粗毛纤孔菌的多酚含量最高,野生粗毛纤孔菌次之;黄酮含量方面,野生瓦宁木层孔菌和栽培粗毛纤孔菌较高。生长环境和菌株种类对桑黄活性物质含量影响较大。
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对XOD的抑制作用
栽培粗毛纤孔菌、栽培瓦宁木层孔菌和野生粗毛纤孔菌的游离酚提取物对XOD有显著抑制作用,其中栽培粗毛纤孔菌抑制效果最佳,野生瓦宁木层孔菌最差,阳性组别嘌醇抑制效果优于所有桑黄提取物。
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高尿酸细胞模型相关结果
确定XOD添加量为0.5 U/mL用于构建HK - 2细胞高尿酸模型。在400 μg/mL浓度内,桑黄游离酚提取物对HK - 2细胞无明显毒性。野生瓦宁木层孔菌和栽培粗毛纤孔菌的游离酚提取物在高尿酸细胞模型中降尿酸活性显著,与模型组相比,尿酸含量分别降低17.34%和12.13%。
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活性物质基础分析
栽培粗毛纤孔菌游离酚提取物中鉴定出19个化合物,主要黄酮类化合物包括柚皮素7 - O - 葡萄糖苷、金丝桃苷等。已有研究表明,金丝桃苷、表儿茶素、茶黄素、地奥司明及木犀草苷等黄酮类物质可能是其发挥降尿酸活性的主要成分。
结论
本研究发现栽培粗毛纤孔菌游离酚提取物中多酚含量显著较高,且该提取物与栽培瓦宁木层孔菌、野生粗毛纤孔菌提取物对XOD有较强抑制活性。野生瓦宁木层孔菌和栽培粗毛纤孔菌在高尿酸细胞模型中降尿酸活性更强。栽培粗毛纤孔菌游离酚提取物中的金丝桃苷、表儿茶素等黄酮类物质可能是主要降尿酸活性成分,为桑黄降尿酸产品开发提供了理论支撑,但仍需进一步体内实验验证。
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